PLA2G2D в дренирующих лимфоузлах: иммунный тормоз

PLA2G2D в дренирующих лимфоузлах оказался частью иммунного тормоза, который может срабатывать ещё до того, как противоопухолевые Т-клетки попадут в саму опухоль. Это меняет привычный фокус: подавление иммунного ответа происходит не только внутри опухолевой ткани, но и в лимфоузлах, где Т-клетки получают первые сигналы и начинают размножаться.

Дренирующий лимфоузел — это лимфоузел, куда оттекает лимфа из области опухоли. Именно там иммунные клетки встречаются с опухолевыми антигенами и формируют системный ответ. Поэтому такой лимфоузел можно считать одним из мест, где противоопухолевая реакция запускается. Работа Anneloes van Krimpen и коллег показывает, что там же может находиться отдельная система её подавления.

Необычное соседство в лимфоузле

Авторы начали с образцов дренирующих лимфоузлов пациентов с меланомой II и III стадии, для которых был известен дальнейший клинический исход. Они сравнивали людей с ранним рецидивом заболевания и пациентов, которые оставались без признаков болезни значительно дольше. С помощью визуализирующей масс-цитометрии исследователи разобрали 372 участка ткани и получили данные примерно о 870 тысячах отдельных клеток.

Особенно заметные различия обнаружились в паракортикальной зоне — участке лимфоузла, богатом Т-клетками. У пациентов, у которых позже развивались отдалённые метастазы, там чаще встречалось определённое клеточное «соседство»: активированные CD8+ Т-клетки располагались рядом с миелоидными клетками, экспрессировавшими высокий уровень PLA2G2D.

PLA2G2D — секретируемый белок из семейства фосфолипаз A2. В этом исследовании его особенно много было в миелоидных клетках дренирующих лимфоузлов, прежде всего в макрофагах. При этом в первичных опухолях и метастазах PLA2G2D-положительных миелоидных клеток было существенно меньше.

Связь с неблагоприятным исходом авторы дополнительно подтвердили в независимых наборах образцов пациентов с метастатической меланомой и немелкоклеточным раком лёгкого.

Человеческая часть работы показывает ассоциацию, а не доказывает, что PLA2G2D сам вызывает рецидив. Поэтому следующий вопрос был принципиальным: способен ли этот белок действительно подавлять противоопухолевый иммунитет?

Т-клетки тормозятся в самом начале

В культуре человеческих Т-клеток PLA2G2D подавлял их размножение после активации, а также снижал продукцию сигнальных молекул и гранзима B — белка, который цитотоксические Т-клетки используют для уничтожения клеток-мишеней. Анализ активности генов показал снижение программ, связанных с клеточным циклом.

Неожиданная деталь: этот эффект в основном сохранялся даже у каталитически неактивной версии PLA2G2D. Иными словами, белок, по-видимому, тормозит Т-клетки не только благодаря своей обычной ферментативной функции. PLA2G2D связывался с поверхностью активирующихся Т-клеток, но конкретный рецептор или молекулярная мишень такого взаимодействия пока не определены.

В мышиных моделях картина стала причинной. У животных без функционального Pla2g2d опухоли росли медленнее. Блокирующие антитела против PLA2G2D также подавляли рост нескольких экспериментальных опухолей. Когда исследователи удаляли CD8+ Т-клетки, преимущество такой терапии исчезало, то есть противоопухолевый эффект зависел именно от этой части иммунного ответа.

Особенно показательна последовательность событий. После блокады PLA2G2D число пролиферирующих опухоль-специфических CD8+ Т-клеток сначала увеличивалось в дренирующих лимфоузлах и крови, а затем эти клетки становились заметнее и в опухоли. Это соответствует идее, что иммунный ответ усиливается у своего «старта», а не только внутри опухолевого микроокружения.

Другой тормоз рядом с PD-1

PLA2G2D действует не так, как хорошо известная контрольная точка PD-1. Поэтому авторы проверили двойную блокаду. В мышах, генетически модифицированных так, чтобы они экспрессировали человеческий PLA2G2D, сочетание антител против PLA2G2D и PD-1 работало сильнее, чем каждое воздействие по отдельности: в разных моделях эффекты складывались или усиливали друг друга.

Особенно выраженным результат был в модели меланомы B16F10, устойчивой к блокаде PD-1.

Это пока доклинический результат. В работе не было лечения пациентов антителами против PLA2G2D и не показано, что такой подход безопасен или эффективен у людей. Исходная выборка для глубокого пространственного анализа человеческих лимфоузлов была небольшой — по 5–6 пациентов в группе, хотя часть наблюдений затем проверяли в независимых когортах.

Кроме того, точная молекула на Т-клетках, через которую PLA2G2D передаёт подавляющий сигнал, остаётся неизвестной.

Есть и потенциальный конфликт интересов: несколько авторов являются сотрудниками Apeximmune Therapeutics, а терапевтическое использование антител к PLA2G2D охвачено патентами, принадлежащими компании.

Главный результат работы лежит не в обещании нового лекарства, а в смене места действия. Иммунная контрольная точка обнаружена не только там, где Т-клетка уже столкнулась с опухолью, а раньше — в лимфоузле, где эта Т-клетка только готовится к атаке.